Differential abundances of four forms of Binder of SPerm 1 in the seminal plasma of Bos taurus indicus bulls with different patterns of semen freezability.

The Binder of SPerm 1 (BSP1) protein is involved in the fertilization and semen cryopreservation processes and is described to be both beneficial and detrimental to sperm. Previously, the relationship of BSP1 with freezability events has not been completely understood. The objective of this work was to determine the differential abundance of the forms of the BSP1 protein in cryopreserved seminal plasma of Bos taurus indicus bulls with different patterns of semen freezability using proteomics. A wide cohort of adult bulls with high genetic value from an artificial insemination center was used as donors of high quality, fresh semen. Nine bulls presenting different patterns of semen freezability were selected. Two-dimensional gel electrophoresis showed differential abundance in a group of seven protein spots in the frozen/thawed seminal plasma from the bulls, ranging from 15 to 17 kDa, with pI values from 4.6 to 5.8. Four of these spots were confirmed to be BSP1 using mass spectrometry, proteomics, biochemical, and computational analysis (Tukey's test at P < 0.05). The protein spot weighing 15.52 ± 0.53 kDa with a pI value of 5.78 ± 0.12 is highlighted by its high abundance in bulls with low semen freezability and its absence in bulls presenting high semen freezability. This is the first report showing that more than two forms of BSP1 are found in the seminal plasma of Nelore adult bulls and not all animals have a similar abundance of each BSP1 form. Different BSP1 forms may be involved in different events of fertilization and the cryopreservation process.

Utilização de diferentes volumes de sêmen na realização do teste hiposmótico em touros adultos da raça nelore / Use of different semen volumes in hypoosmotic test of adult nelore bulls / El uso de diferentes volúmenes de semen en el test hiposmótico en toros adultos de la raza nelore

O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes proporções de sêmen: solução hiposmótica na realização do teste hiposmótico e suas relações com a congelabilidade do sêmen de touros zebuínos. Utilizaram-se 15 ejaculados de três touros adultos da raça Nelore. No sêmen in natura realizou-se a avaliação física e morfológica, a coloração supravital e o teste hiposmótico. No teste hiposmótico foi utilizada uma solução com osmolaridade de 100 mOsm/Kg com 15 minutos de período de incubação a 37 ºC, tanto no sêmen in natura quanto no congelado/descongelado. Foram utilizados quatro volumes de sêmen em 1mL de solução hiposmótica: 10, 20, 50 e 100 µL. As amostras criopreservadas foram descongeladas e foram realizados os testes hiposmótico, coloração supravital, teste de termo-resistência lento e a coloração fluorescente. Os valores médios e desvios padrão do percentual de espermatozoides reativos ao teste hiposmótico em sêmen in natura e congelado/descongelado foram 69,3 ± 11,8 e 20,5 ± 6,8; respectivamente. Não houve correlação do teste hiposmótico com os aspectos físicos e morfológicos e os testes complementares realizados em sêmen in natura e congelado/descongelado. Nenhum teste de integridade de membrana plasmática dos espermatozoides foi capaz de classificar os touros quanto a sua congelabilidade do sêmen. Conclui-se que o teste hiposmótico pode ser realizado com 20 a 100 µL de sêmen in natura, e 10 a 100 µL de sêmen congelado/descongelado em 1 mL de solução hiposmótica, sem interferir em seus resultados, mas deve-se optar por 100 µL tanto para sêmen in natura e congelado/descongelado, porque melhora consideravelmente a leitura das lâminas.(AU)

The objective of this study was to evaluate different proportions of semen: hypoosmotic solution in the hypoosmotic swelling test and their relationship with semen freezability in Zebu bulls. A total of 15 ejaculates from three adult Nelore bulls were used. Physical and morphological features were analyzed in fresh semen, as well as supravital staining and hypoosmotic swelling test. In the hypoosmotic test, a hypoosmotic solution with 100 mOsm/kg osmolality using 15 minutes incubation at 37 °C was used both in fresh and frozen/thawed semen. Four semen volumes in 1-ml hyposmotic solution were used: 10, 20, 50 and 100 µL. Cryopreserved samples were thawed and submitted to hypoosmotic tests, supravital staining, slow thermo-resistance test and fluorescent staining. Mean values and standard deviations of the percentage of reactive sperm cells in the hypoosmotic test in fresh and frozen/thawed semen were 69.3 ± 11.8 and 20.5 ± 6.8, respectively. There was no correlation between the hypoosmotic test and physical and morphological features and the complementary tests performed on fresh and frozen/thawed semen. None of the plasma membrane integrity tests was able to predict bull semen freezability. It can be concluded that the hypoosmotic test can be performed with 20 to 100 µL fresh semen, and 10 to 100 µL of frozen/thawed semen in 1 mL of hypoosmotic solution without interfering with their results, but 100 µL should be used in both, because it considerably improves the view of the slides.(AU)

El objetivo de este estudio ha sido evaluar diferentes proporciones de semen: solución hiposmótica en la realización del test hiposmótico y sus relaciones con la congelabilidad del semen de toros cebú. Se utilizaron 15 eyaculados de tres toros adultos de la raza Nelore. En el semen fresco se realizó evaluación física y morfológica, la tinción supravital y test hiposmótico. En el test hiposmótico se ha utilizado una solución con osmolaridad de 100 mOsm/kg con un período de incubación de 15 minutos a 37 ºC, tanto en el semen fresco cuanto en el congelado/descongelado. Fueron utilizados cuatro volúmenes de 1 mL de solución hiposmótica: 10, 20, 50, y 100 µL. Las muestras criopreservadas fueron descongeladas y realizados los tests hiposmótico, tinción supravital, test de resistencia al fuego lento y la tinción fluorescente. Los valores medios y desvío estándar del porcentaje de espermatozoides reactivos al test hiposmótico en l semen fresco y congelado/descongelado fueron 69,3 ± 11,8 y 20,5 ± 6,8; respectivamente. No hubo correlación del test hiposmótico con las características físicas y morfológicas y pruebas adicionales en el semen fresco y congelado/descongelado. Ningún test de integridad de la membrana plasmática de los espermatozoides han sido capaz de clasificar a los toros cuanto su congelabilidad del semen. Se puede concluir que el test hiposmótico puede ser realizado con 20 a 100 µL de semen fresco, y de 10 a 100 µL de semen congelado/descongelado en 1 mL de solución hiposmótica, sin interferir en sus resultados, pero se debe optar por 100 µL para el semen fresco y congelado/descongelado, porque mejora significativamente la lectura de las láminas.(AU)

Ninety-Day Oral Toxicity Assessment of an Alternative Biopolymer for Controlled Release Drug Delivery Systems Obtained from Cassava Starch Acetate.

The large consumption of biodegradable films from cassava starch acetate (FCSA) as ingredients in food and pharmaceutical products requires the assessment of the possible toxicity of these products. The aim of this study was to investigate the toxicity of biodegradable film from cassava starch acetate after oral exposure of Wistar rats for 90 days. The amount of food consumed and the body weight were weekly monitored. Blood and urine samples were obtained for the assessment of serum parameters and renal function. Histopathological analyses in target organs were also performed. No evidence of clinical toxicity in hematological, biochemical, or renal parameters in the FCSA-treated animals was found. In addition, relative organ weight and histopathological evaluations did not differ between groups treated with FCSA and control. Data obtained suggest that the subchronic exposure to FCSA does not cause obvious signs of toxicity in Wistar rats, indicating possible safety of this biofilm.

Uso de colesterol na criopreservação espermática e fertilidade: uma revisão / Use of cholesterol in sperm cryopreservation and fertility: a review / Uso de colesterol en la criopreservación espermática y fertilidad: una revisión

A criopreservação é um método amplamente utilizado para o armazenamento de células espermáticas em longo prazo. Essa técnica facilita a difusão e a disponibilidade de material genético a ser utilizado tanto na produção in vitro (PIV) como na inseminação artificial, biotecnologia aplicada na maioria das espécies domésticas. Pesquisas têm desenvolvido estratégias para otimizar a utilização do sêmen por meio da redução das injúrias ocorridas durante o processo de criopreservação, e vem conseguindo melhorar os parâmetros espermáticos pós-descongelação com a adição de ciclodextrina carregada com colesterol (CCC) ao sêmen puro ou previamente diluído das diferentes espécies estudadas. Apesar dos resultados promissores, melhor fertilidade do sêmen tratado com CCC tem sido demonstrada somente in vitro, enquanto que in vivo os resultados ainda não são compensatórios, necessitando maiores investigações para tornar viável a aplicação comercial dessa técnica. O objetivo dessa revisão foi compilar alguns resultados dos principais pesquisadores na área, expondo o estado atual e as perspectivas para melhorias da fertilidade do sêmen tratado com CCC...

Cryopreservation is a method widely used for the long-term storage of sperm cells. This technique facilitates the dissemination and availability of genetic material to be used in both in vitro production (IVP) and in artificial insemination, the biotechnology applied to most domestic species. Research has developed strategies to optimize the use of semen through the reduction of injuries occurred during the cryopreservation process, having succeeded in improving post-thaw sperm parameters with the addition of cholesterol-loaded cyclodextrin (CLC) to pure or previously diluted semen samples from the different species studied. Despite the promising results, better fertility of semen treated with CLC has only been demonstrated in vitro, while in vivo results are not yet feasible, requiring further investigation to result in viable commercial application of such technique. The objective of this review is to compile a few results from the leading researchers in the area, exhibiting the current state and prospects for improving the fertility of semen treated with CLC...

La criopreservación es un método ampliamente utilizado para el almacenamiento de células espermáticas a largo plazo. Esa técnica facilita la difusión y la disponibilidad de material genético a ser utilizado tanto en la producción in vitro (PIV) como en la inseminación artificial, biotecnología aplicada en la mayoría de las especies domesticas. Investigaciones han desarrollado estrategias para perfeccionar la utilización del semen por medio de la reducción de las injurias ocurridas durante el proceso de criopreservación, y ha conseguido mejorar los parámetros espermáticos pos descongelamiento con la adición de ciclodextrina cargada con colesterol (CCC) al semen puro o previamente diluido. A pesar de los resultados promisores, mejor fertilidad del semen tratado con CCC ha sido demostrado solo in vitro, mientras que in vivo los resultados todavía no son compensatorios, necesitando de mayores investigaciones para volver viable la aplicación comercial de esa técnica. El objetivo de esa revisión ha sido compilar algunos resultados de los principales investigadores del área, exponiendo el estado actual y las perspectivas para mejorías de la fertilidad del semen tratado con CCC...

Estresse por calor: alterações na fisiologia reprodutiva e estratégias para amenizar seus efeitos negativos na fertilidade de fêmeas bovinas / Heat stress: alterations on reproductive physiology and strategies to mitigate the negative effects fertility of bovine females / Estrés por calor: cambios en la fisiología reproductiva y estrategias para amenizar sus efectos negativos en la fertilidad de hembras bovinas

O estresse por calor, comum em clima tropical, vem sendo considerado um dos principais fatores de falha reprodutiva de fêmeas bovinas, incluindo danos ao desenvolvimento e maturação oocitária, desenvolvimento embrionário inicial e fetal, lactação e endocrinologia reprodutiva. Para tentar minimizar tais prejuízos, é necessário melhor entendimento da influência térmica sobre os processos reprodutivos a fim de aperfeiçoar o manejo para aumentar a fertilidade. Esta revisão tem como objetivo buscar o melhor entendimento de como e quando o estresse por calor afeta a reprodução de bovinos, no intuito de se desenvolver estratégias visando melhorar a fertilidade em ambientes de elevadas temperatura.

The heat stress, common in tropical climates, has been considered one of the major factor in reproductive failure in cows, including damages in the oocyte development and maturations, early embryo and fetus development, lactations and reproductive endocrinology. The genetic adaptation to heat stress is possible not only in relation to the body temperature regulation, but also at cellular resistance level. To try to minimize these problems, a better understanding of the thermal influence on the reproductive processes is necessary, with the aim of improving the reproductive management. This review aims to offer a better understanding of how and when the heat stress affects reproductive function of bovines, in order to develop strategies to increase fertility in environments with high thermal loads.

El estrés por calor, común en climas tropicales, ha sido considerado uno de los principales factores de fracaso reproductivo en hembras bovinas, incluyendo daños al desarrollo y maduración oocitaria, desarrollo embrionario inicial y fetal, lactancia y endocrinología reproductiva. Para intentar minimizar estos problemas, es necesario entender mejor la influencia térmica en los procesos reproductivos, con el fin de perfeccionar el manejo para aumentar la fertilidad. Esta revisión tiene como objetivo buscar mejor comprensión de cómo y cuándo el estrés por calor afecta la reproducción del ganado, buscando desarrollar estrategias para mejorar la fertilidad en entornos de elevadas temperatura.